Дія «Лицар-вампір» відбувається в Академії Кросс, престижному приватному навчальному закладі з незовсім звичайними класами. В Академії Крос два відділення: Денне і Нічне. На Денному вчаться звичайні люди, а учні Нічного вважаються елітою. Студенти Денного класу і їх викладачі не знають, що насправді всі учні Нічного класу — вампіри. Головна героїня, Юукі Кросс, вихованка директора Академії. Разом із Зеро Кірію — іншим вихованцем директора Кросс і спадкоємцем клану мисливців на вампірів — вона, як староста, повинна стежити за порядком в Академії, по можливості не допускати контактів між Нічним і Денним класами, зберігаючи при цьому таємницю вампірів.